Bằng cách nào chúng ta có thể tách chiết được DNA ra khỏi tế bào dưới dạng tinh sạch, không liên kết hoặc lẫn các hợp chất khác?
Xem đáp án và lời giải
Hướng dẫn chấm do TopStudy biên soạn, mang tính gợi ý
Trả lời:
Có thể tách chiết được DNA ra khỏi tế bào dưới dạng tinh sạch, không liên kết hoặc lẫn các hợp chất khác bằng cách sử dụng phương pháp tách chiết DNA gồm 4 bước:
- Bước 1: Phá vỡ tế bào bằng phương pháp lí – hóa (sử dụng chất tẩy rửa loại bỏ màng lipid).
- Bước 2: Biến tính và loại bỏ protein bằng phương pháp sử dụng dung môi hữu cơ và enzyme protease.
- Bước 3: Biến tính và loại bỏ RNA bằng phương pháp sử dụng enzyme Rnase.
- Bước 4: Kết tủa và tinh sạch DNA bằng phương pháp sử dụng ethanol lạnh kết hợp li tâm.
Câu 2
1 điểm
Tóm tắt nguyên lí tách chiết DNA ra khỏi tế bào.
Xem đáp án và lời giải
Hướng dẫn chấm do TopStudy biên soạn, mang tính gợi ý
Trả lời:
Tóm tắt nguyên lí tách chiết DNA ra khỏi tế bào:
- Bước 1: Li giải tế bào bằng phương pháp lí, hóa.
- Bước 2: Biến tính và loại bỏ protein.
- Bước 3: Biến tính và loại bỏ RNA.
- Bước 4: Kết tủa và tinh sạch DNA.
Câu 3
1 điểm
Những enzyme nào được sử dụng để phân giải protein và RNA mà không tác động đến DNA?
Xem đáp án và lời giải
Hướng dẫn chấm do TopStudy biên soạn, mang tính gợi ý
Trả lời:
- Enzyme phân giải protein gồm nhiều loại protease trong đó có proteinase K.
- Enzyme phân giải RNA gồm nhiều loại ribonuclease, một trong số đó là ribonuclease A, RNase A.
Câu 4
1 điểm
DNA có thể kết tủa bằng chất hóa học nào?
Xem đáp án và lời giải
Hướng dẫn chấm do TopStudy biên soạn, mang tính gợi ý
Trả lời:
DNA có thể kết tủa bằng nhiều loại hóa chất khác nhau. Tuy nhiên, DNA thường được kết tủa bằng ethanol lạnh.
Câu 5
1 điểm
Giải thích quy trình nhân bản gene bằng kĩ thuật PCR.
Xem đáp án và lời giải
Hướng dẫn chấm do TopStudy biên soạn, mang tính gợi ý
Trả lời:
Giải thích quy trình nhân bản gene bằng kĩ thuật PCR:
- Bước 1: Biến tính: tăng nhiệt độ để biến tính DNA đích, tách 2 mạch khuôn của gene đích.
- Bước 2: Gắn mồi: cung cấp các đoạn mồi đặc hiệu, hạ nhiệt độ để mồi gắn vào mạch khuôn.
- Bước 3: Kéo dài chuỗi: sử dụng taq DNA polymerase để gắn các dNTP, kéo dài chuỗi polynucleotide.
Quy trình được lặp lại nhiều chu kì để tăng số bản sao của gene.
Câu 6
1 điểm
CDNA là gì? Người ta có thể tạo ra cDNA bằng cách nào và nhằm mục đích gì?
Việc sử dụng các enzyme trong các quy trình tách chiết DNA cho thấy enzyme có kích thước lớn hơn hay nhỏ hơn so với phân tử DNA? Bằng cách nào em biết được điều đó?
Tại sao DNA của vi khuẩn không bị cắt bởi các enzyme giới hạn sẵn có trong tế bào của chúng? (Gợi ý: Chỉ dùng enzyme cắt giới hạn để cắt DNA khi không còn protein nào liên kết với DNA).
Em hãy đề xuất một quy trình tách chiết RNA, biết rằng trong khi enzyme ribonuclease (như Rnase A) phân huỷ đặc hiệu RNA thì enzyme deoxyribonuclease (như DNase I) phân hủy đặc hiệu DNA. Kiểm chứng giả thuyết bằng cách tìm kiếm "Quy trình tách chiết RNA" trên mạng internet.